2 روش استریلیزاسیون مورد استفاده در کشت بافت گیاهی

اگر در مورد کشت بافت گیاهی مطالعه کرده‌اید، می‌دانید که شرایط استریل برای یک عمل موفق کشت در شرایط آزمایشگاهی چقدر مهم است. با این حال، آیا از روش‌های مختلفی که آزمایشگاه‌ها در سراسر جهان برای استریل کردن مواد، ریزنمونه‌ها و تجهیزات آزمایشگاهی استفاده می‌کنند، اطلاعی دارید؟

آلودگی در کشت بافت گیاهی شامل ناخالصی ها، مواد شیمیایی یا عوامل بیماری زا است. این عوامل بافت های کشت شده را برای رشد بیشتر گیاهچه های سالم نامناسب می کند. همچنین خلاص شدن از شر آلودگی به طور کامل دشوار است زیرا گیاهان بسیار مستعد ابتلا به عفونت های پاتوژن هستند.

آلودگی های مختلفی وجود دارد که می تواند در آزمایش کشت بافت شما رخ دهد. میکروارگانیسم‌ها می‌توانند روی لیوان‌ها، پیپت‌ها یا ظروف کشت شما وجود داشته باشند. یک اسپور قارچی یا سلول باکتریایی که در تماس با محیط کشت یا ریزنمونه ها قرار می گیرد به سرعت مواد و ابزار کشت بافت گیاهی را نیز آلوده می کند. اگر می‌خواهید درباره میکروارگانیسم‌های مختلف که باعث آلودگی می‌شوند بیشتر بدانید، مقاله ما در مورد " انواع مختلف آلاینده‌ها در کشت بافت گیاهی " را مطالعه کنید.

محیط کشت بافت همچنین حاوی قند و سایر عناصری است که بیشتر مستعد جذب میکروب‌ها مانند باکتری‌ها، قارچ‌ها و غیره هستند. در طول سال ها، دانشمندان راه حل های مختلفی برای کاهش آلاینده های موجود ارائه کرده اند. اما آلودگی ها هنوز یکی از بزرگترین دغدغه ها در جهان کشت بافت گیاهی است که منجر به از دست دادن عملکرد و بهره وری در بین گیاهان کشت شده می شود.

اجازه دهید اکنون روش‌های مختلف استریل کردن را که معمولاً برای ریشه‌کنی یا اجتناب از آلودگی‌ها استفاده می‌شود، مورد بحث قرار دهیم:

اتوکلاو - استریل کردن با حرارت

استریل کردن محیط ها و ظروف شیشه ای

بسیاری از آزمایشگاه ها از اتوکلاو برای استریل کردن محیط استفاده می کنند که بر اساس اصل گرمای مرطوب کار می کند. استریلیزاسیون با حرارت مرطوب روشی است که در آن از بخار گرم شده و پرفشار برای استریل کردن یک شی (در دمای 121 درجه سانتیگراد، فشار 1.03 بار به مدت 15 تا 20 دقیقه) استفاده می شود. شما می توانید ظروف آزمایشگاهی، ظروف شیشه ای، پیپت ها و محیط های کشت را با کمک اتوکلاو استریل کنید. با این روش می توانید تقریباً از شر همه میکروب ها خلاص شوید. با این حال، اتوکلاوها زمانی که فرآیند کلی در نظر گرفته شود، کار فشرده و زمان بر هستند. یک اتوکلاو حدود 2 تا 3 ساعت برای گرم کردن، استریل کردن و خنک شدن زمان می برد.

امروزه، بیشتر صنایع ماشین‌های آماده‌کننده محیط با کارآمدی بالا را ترجیح می‌دهند که دارای یک گردش کار خودکار برای تهیه محیط های استریل شده هستند. این ماشین‌ها از تکنیک‌های گرمایش مختلف با دقت زیادی استفاده می‌کنند و در مقایسه با اتوکلاو زمان بسیار کمتری می‌برند. تحقیقات نشان داده است که یک محیط استریل شده بسیار سریع نه تنها مقاومت گیاهچه های شما را در برابر بیماری ها افزایش می دهد، بلکه باعث کاهش زمان چرخه رشد برخی از آنها و افزایش سرعت تکثیر برخی دیگر می شود.

استریلایزر - استریل کردن ابزار فلزی

ابزارهای فلزی ممکن است با استفاده از استریلیزاسیون مرطوب زنگ بزنند و کند شوند. بنابراین، اشیایی مانند نگهدارنده ها/ تیغه های چاقوی جراحی، پنس و غیره با استفاده از روش های حرارت خشک استریل می شوند. این استریل کردن با استفاده از ابزارهایی مانند استریلایزر یا استریل‌کننده‌های گلس بید و مشعل‌های بونسن به دست می‌آید که اولی کارآمدتر و ایمن‌تر از دومی است.

در مقاله بعدی به  دو روش دیگر  استریلیزاسیون مورد استفاده در کشت بافت گیاهی اشاره خواهد شد.

شرکت دانش بنیان تجهیز فردوس تجهیزات مورد نیاز شما را در حوزه کشت بافت تامین می کند.

این تجهیزات شامل: گلخانه های تحقیقاتی، اتاق های کشت بافت و رشد گیاه، فیتوترون ها و ژرمیناتورها، هود های لامینار کلاس 1 ، قفسه های نور کشت بافت و رشد گیاه ،دستگاه های استریل کننده از قبیل اتوکلاو، آون و استریلایزر، ظروف، شیشه ها و مواد کشت بافت می باشد.

جهت ارتباط با کارشناس تجهیزات کشت بافت سرکار خانم فراستی پور تماس حاصل فرمایید.

شماره تماس: 09924040145

​

انواع استریل کننده (اتوکلاو) همراه با کاربرد

انواع استریل کننده ( اتوکلاو ):

• استریل کننده های بخار عمودی
• استریل کننده های بخار افقی
• دستگاه ضدعفونی کننده بخار رومیزی

استریلیزاسیون با بخار در دسترس ترین و پرکاربردترین روش استریلیزاسیون است. این روش غیر سمی، مقرون به صرفه، مناسب برای پردازش مواد ناپایدار حرارتی است، خطر عفونت متقاطع را از بین می برد و در برابر تمام عوامل بیولوژیکی، از جمله، بسیار موثر است. پریون ها این روش توسط سازمان بهداشت جهانی و مرکز کنترل بیماری ها برای استفاده در موسسات پزشکی توصیه شده است.

روش استریلیزاسیون با بخار، که در اتوکلاوها انجام می شود، شامل تصفیه مواد با بخار آب در دما و فشار معین برای مدت زمان مشخص است.

بنابراین، ویژگی های اصلی استریلیزاسیون با بخار عبارتند از :

• بخار – “خشک” (گرم شده تا دمای بالاتر از نقطه جوش) بخار ترجیح داده می شود.
• فشار – لازم برای رسیدن به دمای بالا در اتوکلاو؛
• دما – به عنوان یک قاعده، 121 درجه سانتیگراد و 132 درجه سانتیگراد؛
• زمان – دمای تنظیم شده باید برای حداقل زمان لازم برای تخریب عوامل بیولوژیکی در محفظه حفظ شود. برای تجهیزات پزشکی بسته بندی شده، حداقل زمان استریلیزاسیون: 30 دقیقه در دمای 121 درجه سانتیگراد و 4 دقیقه در دمای 132 درجه سانتیگراد است. زمان استریلیزاسیون ممکن است بسته به نوع محصول و مواد متفاوت باشد.

از نظر ساختاری، ضدعفونی کننده ها (اتوکلاوها) به دو نوع تقسیم می شوند:

ضدعفونی کننده هایی که هوا را به صورت گرانشی از محفظه خارج می کنند و دستگاه های پیش تخلیه. در استریل کننده های نوع اول، بخار از بالا یا از طرفین وارد محفظه می شود و هوا را به قسمت پایینی محفظه استریلیزاسیون می فشارد و سپس از طریق خروجی خارج می شود. ضدعفونی کننده های گرانشی عمدتاً برای پردازش محیط های آزمایشگاهی، مایعات، مواد دارویی و محصولات غیر متخلخل که سطوح آنها در تماس مستقیم با بخار است استفاده می شود. در استریل کننده هایی از این نوع زمان استریل شدن مواد متخلخل افزایش می یابد که به دلیل حذف ناقص هوا و در نتیجه کاهش سرعت نفوذ بخار به داخل منافذ می باشد. ضدعفونی کننده های خط مقدم با کارایی بالا مجهز به پمپ خلاء برای حذف هوا از محفظه و بار استریلیزاسیون هستند. بنابراین، بخار به راحتی می تواند حتی در مواد متخلخل نفوذ کند. استریل کننده ها همچنین از نظر نحوه بارگیری (افقی و عمودی)، تعداد برنامه های استریلیزاسیون و عملکردهای اضافی متفاوت هستند.

​